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Titre de projet : Nouvelle méthode de séparation (protéomique et nanotechnique) de la semence sexée chez le taureau

Résumé :

Le sperme sexé joue un rôle important dans l'élevage des bovins laitiers. Les différences de contenu, taille, motilité, charge et antigènes de surface de l'ADN des spermatozoïdes X et Y ont été prises en compte pour la séparation des spermatozoïdes X et Y. Actuellement, la seule technique disponible dans le commerce pour la séparation des spermatozoïdes porteurs de chromosomes X et Y est le tri cellulaire activé par fluorescence. Cependant, cette technique est coûteuse et présente des limites pratiques, notamment un coût élevé, une faible efficacité de tri, la nécessité d'un personnel hautement qualifié et des dommages à la membrane plasmatique, considérant qu'il ne peut pas produire des doses de sperme sexé avec la quantité désirée de sperme pour l'insémination artificielle. Les approches fondées sur l'immunologie et la nanotechnologie se sont récemment révélées des outils attrayants pour la sélection du sperme. Les outils d'analyse protéomique permettent l'identification des protéines exprimées différemment entre le sperme X et Y. Par conséquent, l'utilisation d'anticorps mâles ou spécifiques basés sur les différentes protéines de surface peut être une approche alternative pour déformer les spermatozoïdes porteurs de X et de Y. De plus, les nanoparticules ont été utilisées comme outil de séparation des spermatozoïdes X et Y sans affecter les caractéristiques physiologiques des spermatozoïdes. Par conséquent, le but de ce projet est d'explorer l'application et la combinaison de ces méthodes en utilisant une nouvelle stratégie pour identifier et trier les spermatozoïdes porteurs de X et de Y.

Objectifs du projet:

• Objectif 1 : Évaluation du protéome des spermatozoïdes porteurs de X et Y et préparation d'anticorps
  • Sous-objectif 1a : Détermination des protéines à expression différentielle (DEPs) présentes sur la membrane des spermatozoïdes X et Y
  • Sous-objectif 1b : Préparation et couplage des anticorps aux billes magnétiques

• Objectif 2 : Évaluation des protocoles de tri des spermatozoïdes X et Y ainsi que de l'efficacité du tri
  • Sous-objectif 2a : Séparation des spermatozoïdes X et Y à l'aide de dispositifs de tri cellulaire nanomagnétique (MACS) et microfluidique
  • Sous-objectif 2b : Évaluation de l'efficacité du tri et des paramètres de qualité

Projet: MITACS INNOVATION, Semex Canada, Université de Montréal, Faculté de médecine vétérinaire

Profil désiré:

• Connaissance en techniques moléculaires et immunologiques
• Une bonne capacité analytique et de synthèse
• Capable de travailler en équipe
• Avoir un permis de conduire
• Capable de travailler dans un projet public-privé
• Maîtriser le français et l'anglais

Candidats intéressés sont invités à appliquer maintenant.

Pour appliquer, envoyer un courriel à: rejean.lefebvre@umontreal.ca

• Curriculum vitae
• Une lettre indiquant vos intérêts et objectifs (maximum une page)
• Nom de deux personnes pour référence

Pour information:

Réjean C Lefebvre

Statut : Professeur titulaire

Département : Science clinique et GREMIP

St-Hyacinthe, Université de Montréal

Téléphone : 1-450-779-8753

Courriel : rejean.lefebvre@umontreal.ca

 Project title: Exploration of novel sex sorting methods in bovine semen based on proteomics and nanotechnology approches

Abstract :

Sexed semen plays an important role in dairy cattle breeding. Differences in DNA content, size, motility, charge, and surface antigens of X and Y sperm have been considered for the separation of X and Y sperm. Currently, the only commercially available technique for the separation of X- and Y-chromosome-bearing sperm is fluorescence-activated cell sorting. However, this technique is expensive and has practical limitations including high cost, low-sorting efficiency, requiring highly skilled personnel, and damage to the plasma membrane, considering that it cannot produce doses of sexed semen with the desired amount of sperm for artificial insemination. Immunology and nanotechnology-based approaches have recently emerged as attractive tools for sperm selection. Proteomics analysis tools allow the identification of differentially expressed proteins between the X and Y-sperm. Therefore, using male or specific antibodies based on the different surface proteins can be an alternative approach to skew X and Y-bearing sperm. Moreover, nanoparticles have been used as a separation tool to skew the X- and Y- y-sperm without impacting on physiological characteristics of sperm. Therefore, the goal of this project is to explore the application and combination of these methods using a novel strategy to identify and sort X and Y-bearing sperm.

Objectives:

• Objective 1: Evaluation of proteome of X- and Y bearing sperm and preparation of correspond antibodies
  • Sub Objective 1a: Determination of differentially expressed proteins (DEPs) present on the membrane of sperm X and Y Sub Objective 1b: Preparation and coupling antibodies to the magnetic beads

• Objective 2: Evaluation of X and Y sperm sorting protocols along with sorting efficiency
  • Sub Objective 2a: X and Y-sperm separation using nanomagnetic-activated cell sorting (MACS) and prefabricated microfluidic device
  • Sub Objective 2b: Evaluation of sorting efficiency and quality parameters

Projet: MITACS INNOVATION, Semex Canada, Université de Montréal, Faculté de médecine vétérinaire

Desired profile :

• Knowledge in molecular techniques and immunology
• Have a good analytical and synthesis capacity
• Ability to work in a team and independently
• To have a driving license
• Ability to work in a public-industry project
• Comfortable with French and English

Interested candidates are invited to apply now.

To apply, send an email to: rejean.lefebvre@umontreal.ca with:

• Curriculum vitae
• A cover letter describing your interests and motivation (maximum one page)
• Name and contact details of 2 persons who can act as reference

For more information:

Name : Réjean C Lefebvre

Status : professeur titulaire

Department: Science clinique et GREMIP

St-Hyacinthe, Université de Montréal

Phone : 1-450-779-8753

E-mail : rejean.lefebvre@umontreal.ca